羟基自由基引起的脱氧核糖核酸损伤研究

以鲱鱼精脱氧核糖核酸(Herring sperm DNA)为研究对象,利用紫外光(UV,200～275 nn,66.4 Lx)激发纳米TiO2发生光催化作用介导产生羟基自由基(Hydroxyl radical,·OH),探讨·OH引发DNA氧化损伤特性.采用凝胶电泳和高效液相色谱(HPLC)分析法跟踪DNA损伤历程;应用电子自旋共振(Electron spin resonance,ESR)及分光光度法跟踪损伤过程氧化物种及H2O2相对浓度的变化;运用生物标准样8-9羟脱氧鸟苷(8-Hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG)为内标物,通过HPLC分析DNA损伤产物,研究DNA损伤机理.结果表明,较单纯UV辐照或暗光(Dark)催化条件,DNA浓度10 mg/L,TiO2浓度1.5g/L、pH 7～8,紫外光激发纳米TiO2介导产生·OH引发DNA损伤程度最大;DNA损伤为·OH氧化历程.并伴随有深度氧化过程;DNA结构中鸟嘌吟最易氧化损伤,8-OHdG为DNA氧化损伤中间产物及鸟嘌吟氧化损伤的特异产物.