乙醇提取苦瓜皂甙的工艺研究

I12宁夏医学杂志2005年2月第27卷第2期 Ningxia Med J,Feb27,No.2文章编号:1001-5949(2005)02-0112-03实验研究·乙醇提取苦瓜皂甙的工艺研究孙磊摘要]目的采用乙醇提取苦瓜皂甙,确定最佳工艺。方法采用单因素和正交试验法优选提取苦瓜皂甙的最佳工艺,建立合理可靠的提取条件。结果最佳提取温度70℃、溶剂用量为苦瓜的9倍量,提取时间3小时、乙醇浓度60%。结论工艺可行、合理[关键词]苦瓜皂甙;乙醇;提取[中图分类号]R284.2[文献标识码]AStudy for technology of extracting balsamper glycoside with ethanolSUN Lei. College of phamacy Harbin University of commerce)[Abstract] Objective Adopt ethanol as the solevent to extract balsamper glycoside, and established the optimum process. MethodsSingle-factor and orthogonal design were used to choose the optimum extraction process. So as to ensure the reasonable and reliable extractingcondition Results The optimum temperature is 70, the solvent is 9 times of the balsamper, the extracting time is 3 hours the concentration ofthe ethanol is 60%. Conclusion the process is available and reliableKey words] Balsamper glycoside; Ethanol; Extraction苫瓜系葫芦科苦瓜属植物的果实,又名凉瓜、癞0.10、0.15、0.200.25、0.30ml分别置于具塞试管中,瓜。含有苦瓜素甙F1、I、G、胡萝卜甾醇等活性成水浴挥去溶剂,加入新配制的5%香草醛-冰乙酸溶分,含苦瓜甙(为β-谷甾醇-β-D-葡萄糖甙和5、液0.2ml,高氯酸0.8ml。在60℃水浴中加热15分25、-豆甾二稀醇-3-葡萄糖甙的等分子混合物)、钟,流水冷却,加冰乙酸5ml,摇匀,在15mn内于波长苦瓜蛋白、5-羟基色胺、多种氨基酸、果胶、类胰岛548m处分别测吸光度,结果见表1。另取无水乙醇素或称植物胰岛素( Plant insuliu)等。苦瓜性味苦随行空白对照(取0.35m于具塞试管中,水浴挥去溶寒,具有消暑涤热、明目解毒之功效。药理研究表剂)。以吸光度(A)为纵坐标,人参皂甙Rgl浓度(C)明,苦瓜具有降血糖、抗生育、抗突变、抗菌、免疫调为横坐标绘制标准曲线。经统计处理,得线形回归节和抗HV等作用5。关于苦瓜皂甙的药理作用方程为:Y=0.002x+0.0135,r=0.994的研究已取得了很大进展,但苦瓜皂甙提取工艺的表1人参皂甙Rg1标准品浓度与吸光度研究尚少见报道,本实验研究了用乙醇提取苦瓜皂体积(m)0.00.050.100.150.200.250.90甙,并确定了最佳提取条件。浓度(风gn0255075100125150材料与方法吸光度00.0740.1320.1830.2260.2790.3371.1一般资料:苦瓜(购自哈尔滨第一百货商场),人参皂甙Rg1标准品(中国药品生物制品检定所)。2.2苦瓜皂甙的测定:将苦瓜洗净、去籽、切片、烘2方法:采用单因素和正交试验法优选提取苦瓜干、粉碎、脱脂、烘干,用乙醇回流提取。将提取液抽皂甙的最佳工艺。仪器为721分光光度计(上海第三滤、过滤,在60℃水浴中浓缩,然后用无水乙醇定容分析仪器厂),XT系列原装天平(瑞士 PRECISA公至10ml,过滤,取1ml滤液于具塞试管中,用无水乙司)。醇再定容至10ml,取0.2ml于具塞试管中,在60℃水1.3统计方法:通过正交实验表做方差分析得到结浴中挥去溶剂,加入新配制的5%香草醛-冰乙酸溶论液0中国煤化工℃水浴中加热15分2结果钟匀,在15分钟内于波CNMH21标准曲线的制备:精密称取人参皂甙R1的标长54x儿度乙醇0.35ml作空白准品2mg,加无水乙醇溶解定容至4ml,摇匀,作为对对照)。照品溶液。精密吸取上述对照品溶液0.05、2.3单因素的确定[作者单纷蛟「商业大学药学院,黑龙江哈尔滨1500762.3.1不同乙醇用量提取苦瓜皂甙:分别称取2g苦宁夏医学杂志2005年2月第27卷第2期 Ningxia Med J,Feb.2005,vo27,N.2l13瓜粉末于4个提取瓶中,然后向其中分别加入料液用量、提取时间、误差为4因素,选取3个水平进行实比为1:7、1:8、1:9、1:10的80%的乙醇,在80℃水浴验。因素水平见表6,正交实验结果见表7。中回流提取3小时。测吸光度(见表2表6因素水平表2不同乙醇用量提取苦瓜皂甙的结果水平用量产量(g)得率%吸光度提取温度(℃)料液比(wy)提取时间(b)1:70.01030.520.2401:80.01081:91:90.01230.620.2851:10表7L(3)正交试验设计及结果23.2不同乙醇浓度提取苦瓜皂甙:分别称取2g苦甙含量瓜粉末于4个提取瓶中,然后分别向其中加入9倍的40%、60%、80%、95%的乙醇,在80℃的水浴中回流14.746提取3小时,测吸光度(见表3)。12.379表3不同乙醇浓度提取苦瓜皂甙的结果14.594浓度%产量(g)得率%吸光度2345678922233332313121233122313.7l0.00850.430.20211.1970.000.460.2130.008038.79534,1403840.67443.26041.47539.64539.46841.53839.27639.7823.3不同提取时间提取苦瓜皂甙:分别称取2g苦1293211,380瓜粉末于4个提取瓶中,然后分别向其中加入9倍的k213.55814.42013.82513.21560%的乙醇,在80℃的水浴中分别回流提取2h、3h、k13.15613.84613.09213.261极差R0.6263.0401.070.0914h、Sh,吸光度结果见表4。优水平表4不同提取时间提取苦瓜皂甙的结果时间(h)产量(g)得率%吸光度将上述结果做方差分析,结果见表80.01260.290表8方差分析30.01270.640.2920.01230.62误差来源“差半方和自由度方差比临界值显著性贡献率0.01170.560.2700.604246.46219.000B15.64921203.769193%023.4不同温度提取苦瓜皂甙:分别称取2g苦瓜粉末于4个提取瓶中,然后分别向其中加入9倍的误差Enor0.0100.0058.13760%的乙醇,分别在50℃、60℃、70℃、80℃的水浴中回流提取3小时,测吸光度(见表5)。结果显示,乙醇的浓度对苦瓜皂甙吸光度的影表5不同温度提取苦瓜皂甙的结果响最小,可以视为误差列。其他3个因素,通过方差温度℃产量(g)得率%吸光度分析,对苦瓜皂甙含量均有非常显著的影响,并确定0.01140.570.2650.01170.59最佳提取工艺条件为:A2、B2、C20.01440.723讨论0.0129中国煤化工提取工艺进行了研究,通HHsCNMHG了最佳提取工艺的条件2.4正交实验:根据单因素实验结果,选择影响苦为取∪,乙用里为苦瓜的9倍量,提取瓜皂甙类化合物提取效果各因素中有意义的水平做时间为3小时,乙醇浓度为60%。通过对实验结果正交实验,对结果进行极差和方差分析,以确定最佳的分析确定了影响因素的主次:料液比→提取时间的提势秀皴果用L(3)正交表,以加热温度、剂→提取温度,保证了最大限度地提高提取率。用乙宁夏医学杂志2005年2月第27卷第2期 Ningia Med J,Feb.205,V27,N醇作为提取溶剂,而不用甲醇,是考虑到它的安全性,同时乙醇价廉,可以用于工业上大量的生产提31江苏新医学院中药大辞典(上册)M.上海:上海科技出版社[4】孙宝莹.苦瓜皂甙的药效学实验研究[J」.河南中医药学刊[参考文献]94,9(6):19]姜瑴苦瓜皂甙降糖作用的临床观察J实用中西医结合杂志,[5]张旭忠.苦瓜抗菌作用的研究[.中草药,1995,26(10):561996,9(3):179[收稿日期]2004-11-15[责任编辑]杨自革[2]陈庆全.实用临床草药[M].第2版.福建:暨南大学出版社文章编号:1001-5949(2005)02-0114-01子宫体血管外皮肉瘤1例沈华[关键词]子宫体;皮肉瘤[中图分类号]R713.42[文献标识码]B1病例资料广泛子宫全切术,术后剖开子宫,肌层呈均匀性增厚,切面呈患者女,38岁,孕6产4,主因月经周期缩短,月经量增多灰白色海绵状改变宫腔未见异常,剖开后壁凸出肿物及左侧5年,加重20天,于2002年9月13日急诊入院。包裹卵巢及输卵管,内见脑浆样组织流出,剖开左侧骨盆漏斗患者既往月经周期规律,经量正常,痛经(-)。5年前无韧带,内有瘤栓形成。常规送病检,术后2天,术前病检结果:明显诱因出现月经周期缩短,经期延长,经量较前明显增多。送检组织中血管弥漫增生血管间充血,血管周围细胞紧密排经期伴下腹坠痛及腰骶部胀痛,曾在院外多次诊治,效果不列整个组织呈息肉状,外皮有柱状或立方上皮被覆。考虑子佳。末次月经2002年8月23日,阴道流血至入院,量多,未见宫血管外皮瘤。术后病理诊断:①子宫体血管外皮肉瘤有坏烂肉样组织及水泡状物排出,近3天出现头晕、眼花、阴道大死,卵巢、输卵管、韧带及另送组织中均见侵犯转移,肌间淋巴量流血,故急诊入院。既往体健,无手术及外伤史,无咳嗽咳管中有瘤栓;②宫颈黏膜慢性炎。痰,无明显消瘦及体重减轻,大小便正常。2讨论查体:BP80/50mmHg,发育正常,营养中。重度贫血貌。血管外皮瘤是一种起源于血管外皮细胞的肿瘤,它的生妇科检查:外阴发育正常,婚产型。阴道内有暗红色血液,量物学行为可有良性,恶性之分,但其组织形态目前尚无定论。多。宫颈肥大、光滑、质硬。宫体约孕3个月妊娠大小,凸凹本瘤较为少见,本瘤可发生于任何年龄组患者,男女性别的分不平,质硬,活动欠佳,触痛明显。于左侧附件区可触及约布无明显差异。本瘤可发生于身体的任何部位,但以下肢、腹4cm×3cm大小肿物囊性感,与子宫关系密切,右附件区未触膜后和头颈部为最常见。多见于深部肌肉、深筋膜甚至累及及明显异常。骨膜,发生于子宫者罕见,临床未见报道过。该瘤的病程长辅助检查:①B超:宫体前位,体积增大,轮廓不规则,宫不一,从数年至数十年,生长缓慢,临床上早期多表现为无痛壁回声不均匀。在后璧可见大小约5.2cm×3.3cm实性包块,性肿块,随着病变的发展,周围脏器可因肿瘤体积的增大而产边界欠清,内回声不均匀,可见片状液区回声。另在前壁近宫生压迫或浸润的症状;子宫肉瘤罕见,是一种恶性程度极高的颈处见2.4cm×2.2m低回声包块,边界欠清。超声诊断:子女性生殖器官肿瘤,子宫肉瘤是来源于子宫肌层或肌层内的宫多发性实性包块(考虑子宫肌瘤);②血常规:HB7g1,其结缔组织或子宫内膜的结缔组织,约占子宫恶性肿瘤的2%余各项值正常;③胸部X线片:未见异常。4%,好发于绝经后的妇女,子宫肉瘤最主要的突出症状,阴入院诊治:①子宫多发肌瘤;②失血性休克;③失血性贫道不规则流血,量或多或少,下腹部包块迅速增大,晚期肉瘤血。入院后积极治疗休克,2小时后患者血压1007mk。向周围组织浸润,并压迫周围组织或脏器,即引起下腹痛及腰般情况好转,急行清宫术,术中探宫腔13cm,感宫腔内平滑痛等,当压迫直肠、膀胱时即出现相关脏器被压迫的症状,癌刮出少许内膜组织送病检〔本院无快速冰冻切片)。于入院第转移至腹膜或大网膜时可出现血性腹水疾病后期,患者往往2天,患者阴道流血量又剧增,故急行全子宫切除术,术中见有恶液质、消瘦继发性贫血等全身衰竭现象。子宫增大约3个月妊娠大小,质硬,于子宫后壁可见一约5cm具十逦的密心埕月经周期短,月经量增×3cm大小肿物凸出,似浆膜下肌瘤但与宫壁界限不清,质多中国煤某化二病年龄,临床症状及体脆。左侧输卵管增粗约拇指状变短,伞端与该侧卵巢包裹形征完CNMHG见,致使入院时诊断有成盲端,增大约5cm×4cm×3am。左侧骨盆漏斗韧带增粗,呈误,但术中发现有恶变倾向,故手术范围选择恰当,未延误治黑紫色,左侧主韧带增厚,肉眼观有恶变傾向。故行次疗。该瘤易转移至肺部,故应常规行肺部Ⅹ线摄片,术后常规化疗。作者邬月聂市人民医,宁夏園頭7360[收稿日期]2004-07-26[责任编辑]杨自革