黄芩乙醇回流提取工艺研究

实用中医药杂志2013年6月第29卷6期(总第245期)JOURNAL OF PRACTICAL TRADITIONAL CHINESE MEDICINE 2013. Vol 29 No6黄芩乙醇回流提取工艺研究杨宏静(重庆三峡医药高等专科学校,重庆404020)[中图分类号]R282.710.2[文献标识码]A[文章编号]1004-2814(2013)06-492-02摘要]目的:研究优选黄芩乙醇回流的提取工艺。方法:采用单因素考察及正交试验设计,以黄芩苷的含量为考察指标优选黄芩提取工艺。结果:黄芩提取工艺选择为加8倍量θ%乙醇提取2次,第1次2h,第二次1.5。结论:用此方法提取黄芩药材效率高、结果稳定。[关键词]黄芩;黄芩苷;单因素考察;正交设计;提取工艺Abstract]Objective: to study the best extraction process for Scutellariae Radix. Methods: Using single factor and orthogonal design todetermine the content of baicalin as the index of evaluation Results: The optimum condition for the extraction of Scutellariae Radix was adding 8 times of60% alcohol, extracting for 2 hours first time and 1.5 hours second time, totally extracting 2 times. Conclusion: The optimum condition was efficient andI Key words Scutellariae Radix; Baicalin; Single factor; Orthogonal design; Extraction technology黄芩为唇形科植物黄芩 Scutellaria baicalensis Georgi合并,定容至200mL量瓶中,备用的干燥根。黄芩味苦、性寒。归肺、胆、脾、大肠、黄芩苷含量测定方法:①对照品溶液的配制:取小肠经,具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎的功效黄芩苷对照品约10mg,精密称定,置250mL量瓶中。黄芩中主要含有黄酮类化合物,以黄芩苷为代表的加甲醇溶解并稀释至刻度,即得。②供试品溶液的制黄酮类成分是黄芩抗菌、抗炎、解热的主要有效成分3。备:各精密量取提取液2mL,置50mL量瓶中,加甲醇为了充分提取黄芩的有效成分,我们用单因素考察及正稀释至刻度,摇匀,精密量取1mL,置10mL量瓶中交试验设计,对黄芩的提取工艺进行了硏究,确定了适加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,即得。③色谱条件合黄芩生产提取的工艺。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.2%磷1实验仪器与材料酸溶液(45:55)为流动相,流速lmL/min;检测波长仪器。回流提取装置、高效液相色谱仪( Agilent 1100)、28σnm。④测定法:分别精密吸取对照品溶液和供试品色谱柱: Waters Sunfire CI84.6×150mm。溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定,即得。试剂与药品。黄芩药材(购于安国以岭中药饮片有实验结果见表限公司)、黄芩苷(批号110715-200815,购于中国药表1黄芩提取溶媒考察结果实验号因素水平黄芩苷含量(mg品生物制品检定所)、乙醇为医用级、甲醇为色谱纯乙醇水为重蒸水。60%乙醇87.6270%乙醇2方法与结果2.1提取溶媒考察结论:由以上结果可知,60%乙醇作溶媒时,黄芩素水平:参考有关文献中黄芩的提取工艺研究苷含量高于水和其它浓度乙醇作溶媒时黄芩苷的含量选取水、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇为故选择60%乙醇为提取溶媒。单因素考察水平,进行试验22正交试验中国煤化工正交设计实验方法:取黄芩选净,称取15g,分别加入6倍CNMHG次数(A)、量的溶剂,回流提取2次,每次1.5小时,提取液滤过,提取时间(B)、加醇量(C)为考察因素,以黄芩苷的实用中医药杂志2013年6月第29卷6期(总第245期)JOURNAL OF PRACTICAL TRADITIONAL CHINESE MEDICINE 2013. Vol 29 No6含量为指标,选取如下水平进行试验,见表2。定的工艺为A2B(3,2C2,即加8倍量60%乙醇提取2次表2因素水平表第1次2h,第2次1.5h。水平提取次数提取时间加醇量(次)(h)(相当于药材倍数)23验证试验取药材,浄选干燥,粗碎,按处方配比,称取黄芩15g,以60%乙醇为提取溶媒,按最佳工艺A3B3C3组实验方法:取药材,净选干燥,粗碎,按处方配比合条件和选定工艺A2B(3,2)C2的组合条件进行重复称取葛根15g,以60%乙醇为提取溶媒。在平行操作的验证对比实验,测定黄芩苷的含量,测定结果见表5条件下,按L9(3)4正交表,回流提取,提取液合并長5验证试验结果滤过,减压回收乙醇,适量浓缩,转移至1000mL量瓶中,试验号试验条件黄芩苷含量(mg/均含量(mA, B,C3110.07108.16放冷至室温,加60%乙醇稀释至刻度,摇匀,备用。107,72A, B,Cs106.68黄芩苷的含量测定方法:同上。23456A, B104.08102.96实验结果见表3和表4。2B(3.2)C2102,15表3黄芩正交实验表由上表可见,以黄芩苷的含量为考察指标,最佳工实验号4(次)B(h)C(倍)D(空白)Yi(mg/g)艺ABC3和选定工艺AB(32C2的差距均不大;但选定工艺省工节能,故选定AB(3,2C2为提取工艺,即药材234567891.69加8倍量60%乙醇提取提取2次,第1次2h,第2次1.5h23讨论106.541.5黄芩中所含黄酮类成分为其主要有效成分,此类成266.16263.86分易溶于乙醇。通过单因素提取溶媒的考察,得出此类296.79281.75276.3028240311.2228694294.6928成分在60%乙醇中溶解度较大。用正交实验设计,优选l2514563970884.1569622.1071123.56G=834.358808430793830676341.6979749.76CT=7744.61了影响提取物收率的3个因素,得出最佳提取工艺,结968578982334.5686842.2081658.78Rj=+lij+236398.58232558.7723280599232532.09合实际生产,对各影响因素进行了优化,最终确定了黄芩的提取工艺为加8倍量60%乙醇提取2次,第1次提方差分析方差来源离均差平方和自由度均方取2h,第2次提取1.5h135791[参考文献]C[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部))=1900,F001(2,2)(2010版)[M].北京:中国医药科技出版社结果:由表3可知,3个因素的影响大小顺序为提2010:283取次数大于加醇量大于提取时间。最佳工艺为A3BC3[2]高学敏.中药学[M].北京:人民卫生出版社即加10倍量60%乙醇提取3次,每次2h。表4中方1998:118差分析表明,A因素对黄芩苷的含量有显著性影响(P[3]李欣,魏朔南.黄芩的生物学研究进展「J].中国<0.05),B因素和C因素对黄芩苷的含量均无显著性野生植物资源影响。A因素中,随着提取次数的增加,黄芩苷的含量[4]丁芳林,张雯杰,陈波,等.正交法优化超声醇提虽有不同程度的增加,但Ⅱ到Ⅲ增幅变小,为了缩短生产周期,采用提取2次。B因素对黄芩苷的含量无显著黄芩活性成分研究[J].湖南中医药大学学报008,28(3):14-1性影响,考虑到浸提时溶媒对药材组织的浸润和渗透过[5]宋承富程,故将提取时间选为第1次2h,第2次1.5h。C因素空[J].中华中中国煤化工医药学刊对黄芩苷的含量亦无显著性影响,考虑到药材提取的吸CNMHGL收福日期]2013-02-16收溶剂膨胀,因此将用量选定为8倍量。故经优选后确