乙醇对大鼠胃粘膜的影响

SSN1009-3079C14-1019世界华人消化杂志2000年3月第8卷第3期355表2不同阻断剂对NOS活性及NO合成水平的影响程度持续至损伤后24h.NO组织NO胃液胃粘膜损伤后PTK和NOS活性呈现相似的变化规律,应分组g白mmdg蛋min)(nmol mg蛋白min)(ud)用PTK选择性抑制剂使胃粘膜NOS活性、组织和胃液NO水对照组3.12±0.53 DOC9.31±1.68181.39±19.24平分别下降了25.4%,22.5%和19.3%.表明PK可能参与6.89±0.51.60±2.88394.79±22、13mc+typy5.140.3715.19±2.35318.78±26.486.8n合成的调节但PTK激活后导致细胞内NOS活性变化的P<0.01,其余各组,P<0.01v对照组机制仍不清楚,推测PTK激活后导致细胞内Ca2+浓度增高可能是其重要的机制之一,因为细胞内Ca2+浓度增高是受体型3讨论PT激活后细胞内第二信息传递者,而细胞内NOS活性的提胃粘膜在受到一定程度的损伤性刺激后,可启动快修复机高有赖于细胞内Ca2+浓度的增高,9NOS激活后合成NO增制使胃粘膜迅速恢复其完整性,以避免损伤向深层发展,这是加,而NO反过来又对细胞内a+浓度起负调控作用因而生胃粘膜抵抗疾病的一种重要的屏障能力1,21胃粘膜快修复机长因子受体的激活、NO的合成、以及Ca2稳态组成细胞内信制主要表现为损伤区周围或深部活细胞的迁移,由于不需要号传导的一个复杂的调节网络4DNA的复制和蛋白质的合成,只需要对细胞内一系列功能蛋白胃粘膜表达有多种生长因子多肽,而且有结构型NOS高表质的适当修饰即可完成,因而是一种快速的反应,但这种机制达,在胃粘膜损伤后,PTK和NO出现迅速的反应性变化,表明仍不甚清楚3-61.在胃粘膜损伤修复过程中,生长因子多肽参PTK和NO共同促进了损伤后胃粘膜上皮的快速修复由于与其调节,而蛋白氨酸激酶(PTK)是生长因子受体胞内区行PTK对NO的合成有一定的影响,PTK的作用可能在一定程度使信号传递的一个主要的功能部分,其活性变化必然对胃粘膜上通过影响NOS的活性以及NO合成而完成,但其深层机制有修复具有重要影响,但其机制仍不清楚[2待进一步研究本文结果表明,胃粘膜损伤后,PTK活性发生显著变化,而且这种变化主要发生于胃粘膜修复的早期.损伤后30min呈短4参考文献暂下降,可能是因为损伤性因素仍然大于修复性因素,1h后开1 Relan NK, Fligiel SEG, Dutta Tureaud, Chauhan DP, Majumdar APN始上升,并在3h内迅速达到峰值,提高的幅度为160.69%. muoroard and effects of aging. Lab Imesr 1995; 73: 717-726 2 Playford RJ. Peptides and gastruintestinal mucsil integrity. Gut, 1995:37: 595然在胃粘膜修复的中后期,PTK活性逐渐降低,但其活性较基础水平增高一直持续至48h,表明PTK可能参与胃粘膜完整性 3 Peimela H, Goddard P], William S. Present views on restitution of gastrointestinal epithelium. Dig Dis Sci, 1995:40: 2495-2496修复的整个过程,而损伤后24hPTK活性二度增高可能是由 4 Moncada S, Palmer RMJ, Higgs EA. Nitric oxide: physiology, pathophysiology, and pharmacology. Pharmacol Rev, 1991: 43: 109-142于多种生长因子表达增加的结果,这一时期PK活性再度增5 Tepperman, voroolo Effect of neutropenia on gastric mucosal ty and e rat. Dig Dis Sci, 1993;38:2056用 Konturek SK, Konturek PC. Role of nitric oxide in the digestive system我们在胃粘膜组织匀浆中检测到NOS活性7,8,并且在胃7e ison O'Brien PE Protection against gstrice粘膜中度损伤性刺激后可发NOS活性发生与PTK相似的变 ischemia-reperfusion injury by nitric oxide generators. Dig Dis Sci, 1994:39: 366化,在损伤后的早期迅速提高,并且NO的合成增加.组织NOS8 Caskun, Yegen BC, Alican Peker Kurtel. Cold restraint stress inducod活性和NO以及胃腔内的NO水平在胃粘膜损伤后3h达到峰 ide Sci64:956-963值,上升的幅度分别为118.5%,123.2%和130.15%,其增高的 morphine The rde of endo3 phine. Eur Pharmarod, 1994; 255: 33-37IN10009Cn14-1019/R世界华人消化杂志2008(3):355研究快报乙醇对大鼠胃粘膜的影响灌注入胃能引起全胃肠道(以胃为主)的粘膜病变,并延缓实验动物急性胃粘膜病变的自然愈合(4-81.本实验试图探讨0苏红曹之宪林兆鑫800mL/L酒精灌注法所诱发的动物胃粘膜损害的发病机制, Subject headings ethanol; gastric mucosa/ pathology以便指导临床 tumor necrosis factor主题词乙醇;胃粘膜/病理学;肿瘤坏死因子1材料和方法众所周知,正常胃粘膜的完整性是由攻击因子与防御因子1.1材料选择健康早SD大鼠,体质量190g~230g,每组16的动态平衡来维持的,一旦这一平衡遭受破坏就会导致粘膜损只~18只,实验前24h禁食不禁水;分别胃内灌注蒸馏水正害1-3.据报道,各种损伤因子如酒精(ETOH)、消炎痛(M)经常组)和800mL/L乙醇(ETOH8mL/kg,酒精组),随后自由进1中山医科大学孙逸仙纪念医院消化内科食及水,于72h处死广东省广州市5101201.2方法香港大学医学院药理系1.2.1胃粘膜病变及浆膜血流量测定上述处理72h后,经乙3香港大学玛丽医院胃肠肝病内科开隆露置用光齐普仪在古置测定奖膜血356issn1009-3079cn14-1019/r世界华人消化杂志2000年3月第8卷第3期损伤面积(mm2),然后分别计算每组血流及损伤面积,并刮取胃本实验结果表明,试验组PCE2水平均显著高于对照组(P粘膜层组织迅速置入液氮后转入-70℃低温冰箱保存,用于测<0.01),但仍未能提供有效保护作用,说明酒精所致大鼠胃粘定粘膜MPO,PGE2及TNFa水平膜损害尚存在其他机制.据报道,6,13ETOH诱导的粘膜病1.2.2胃粘膜PGE2测定采用放射免疫学方法,碘标记的变与粘膜静脉收缩、GMBF降低有关,而且其损伤程度与PGE放免试剂盒(Amersham International PIC)求操作,用yGMBF呈负相关3.S. Konturek et al发现乙酰水杨酸可引闪烁仪测放射性CPM,并换算为:g/mg上清蛋白起剂量依赖性急性胃粘膜病灶增多并伴PMN增加、血液PGs1.2.3胃粘膜MPO活性测定取冻存胃粘膜层组织称重,在降低,但重复试验诱发粘膜的适应性改变,此时粘膜血流增加、4℃下制成匀,收集上清液,用 BECKMAN DU6650分光光度EGF及细胞增殖均显著升高,而PMN明显减少本实验结果仪测定其在437mOD值,并换算为酶活性单位(IU/g上清蛋未发现800mL/ ETOH对浆膜血流有影响,可能与酒精浓度、白)剂量、作用时间及测定GSBF时的部位有关1.2.4胃粘膜 mTNFa测定按 Factor-XTMst- Mouse Tsuboil et al1研究发现非体类消炎药能促进人淋巴TNF.酶标仪免疫试剂盒(Genzyme,USA)操作,用 BIO-RAD细胞合成TNF2本实验两组TNF水平无差异,提示可能 MODEL3550孔板读数仪测定其450nm的吸收峰,再换算为TNF并非ETOH损伤粘膜的机制或与所给酒精的剂量、疗程g/mL上清蛋白不足以引起粘膜TNF水平的改变,值得进一步探讨统计学处理参数以均数土标准差表示,两组均数的显著与正常组比较,除SBF,TNF无明显变化,试验组粘膜损性检验用t检验,以P<0.05为显著性水准伤面积显著增加伴有粘膜MPO活性及PGE2水平明显升高(P<0.01),提示800mL/ ETOH所致的损伤与PMN活化、浸润2结果等攻击因子增加有关,而与内源性防御PGE水平无关.2.1800mL/ ETOH对鼠胃粘膜损伤的影响(表1)2.2酒精对鼠GSBF,Pe2,MPO及TNFa的影响(表2)4参考文献 1 Robert A, Nezamis JE, Lancaster C. Harchar AJ. Cytoprotexction by表1鼠胃粘膜损伤的改变±s prostaglandins in rats. Prevention of Gastric necrosis prodooed by alchohol, HCI, NaOH, Hypertoric NiCI, and Thermal Injury. Gastroenterology, 1979; 77:433分组出血点(mm2)糜烂点(mm2)-443对照组n860.00±0.000.00±0.00 2 Rairsdard KD. Me rinal toxicity of nonsteroidal anti-酒精组11.62.003.94±1.02b inflammatory drugs. S Lacy ER, Ito S. M1989:24(sup13):9-16bp<0.01,对照组 treatment with g of acetic induced gastric uleers in mats6:393-402表2800mL/ ETOH(8mL/kg)对大鼠胃粘膜的影响 5 Ojihara Y, Okabe S. M ays gastric ulcer±s) healing in the rat armeol, 1993;61:123-1317 6 Konturek SI, B M.. oastic Rale of对照组380.0438045474.61 bkood flow in gastric酒精组37.83±0.43912.08±79.10103.79±10.9762.67±7.97 adsption to 7 Kvietys PR, Twohig B urty to the ratP<0.01,对照组 gastric mucosa. Ro ved radicals. Gastrventeralogy, 199 8 Eastwood GL. P3讨论 Gasroenterlogy 9 Wallace.大量的临床与实验证据表明,酒精可诱发胃粘膜急性损 rotection pathogenesis ary,1992:27伤3121但其确切的发病机制尚不清楚.PMN被认为参与其损(Sppl192):3 10 Alican I, Cask伤机制,PGs减少则解除其对PMN活化的抑制,PMN的粘膜 neutrophils inin rtel H. Rode of s. Inflamm Res,1995;44:164-168润增加并进一步释放MPO、氧自由基、活性氧化代谢产物如bH al anti超氧化阴离子(O2-)、蛋白酶并粘附于血管内皮造成大血管闭 inflan塞等方式导致粘膜损伤.正常粘膜细胞对损伤有一定抵抗能力,所以PMN与靶细胞的比率必须达到一定的非生理性水平12hph(>20:1),才能引起损伤,如同时存在其他炎症递质和细胞介13 Cho CH,Chen素,则该比率可以降低,而非活化的PMN几乎不引起胃粘膜上 and reflectance nder ischemic and皮细胞损伤.超氧化歧化酶(SOD)则可通过分解超氧化阴离子(O2)为过氧化氢和氧,对PMN介导的粘膜损伤有保护作用6,9,10,15本实验结果提示,800mL/ ETOH引起粘膜 apri):209 Abstr)Mpo活性显增加p<0.01)支持pM活化及释放的MPO15 5 Kowol Kopstsis Fligiel SEGc Callewert Neutrophil mediated injury to gas l surface cells. Dig Dhis Sci, 1994: 39: 138-144参与胃粘膜病变的形成