芦笋皮乙醇提取物的抑菌活性研究

※基础研究息品科字2010.WL.31,No.l5芦笋皮乙醇提取物的抑菌活性研究冯翠萍,张培宜,张帅,李泠鸰(山西农业大学食品科学与工程学院,山西太谷030801)摘要:研究芦笋皮乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌和青霉毛霉、黑曲霉的抑制作用,采用牛津杯法对不同质量浓度的芦笋皮乙醇提取物进行抑菌实验。结果表明:芦笋皮乙醇提取物对细菌和霉菡均有抑制作用,抑制细菌的能力明显强于霉菌;对金黄色葡萄球菌最低抑制质量浓度为lg^0OmL其氽4种细菌均为5g/00mL,且随着质量浓度的增大抑菌作用增强;对青霉、毛霉、黑曲霉的最低抑制质量浓度分别为10、30、40g/100mL。关键词:芦笋皮厶醇提取物;牛津杯法;抑菌活性Anti-microbial Activity of Ethanol Extract from Asparagus officinalis PeelFENG Cui-Ping, ZHANG Pei-yi, ZHANG Shuai, LI Ling-lingCollege of Food Science and Engineering, Shanxi Agricultural University, Taigu 030801, China)Abstract:Oxford cup method was used to measure the anti-microbial activities of ethanol extract from Asparagus offipeel against Staphylococcu saureus, Eschrichia coli, Bacillus subtilis, Shigella, salmonella and Penicillium, Mucor and Aspergillusniger. The results indicated that all these microorganisms were effectively inhibited by the extract and the antibacterial activitywas much better than the anti-mold activity. The minimum inhibition concentration(MiC) was 1 g/100 mL for Staphylococcuaureus and 5 g100 mL for other 4 bacterial species. The antibacterial effect was in a concentration-dependent manner. TbeMICs were 10, 30 g/100 mL and 40 g/100 mL for Penicillium, Mucor, and Aspergillus niger, respectivelyKey words: ethanol extract from Asparagus officinalis peel: Oxford cup method; anti-microbial activity中图分类号:S6446:Q935献标识码:A文章编号:1002-6630(2010)15007303芦笋( Asparagus officinalis L.),又名石刁柏,天醇提取物的抑菌作用明显强于水提取物9。本实验对芦门冬属百合科宿根性多华生草本植物,是一种药食同源笋皮厶醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草的蔬菜。我国《神农本草经》将芦笋列为“上品之芽孢杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、青霉、毛霉、黑上”。芦笋中含有许多活性成分,如黄酮类物质、天曲霉的抑制作用进行研究,旨在为天然抗菌剂提供原门冬酰胺、天门冬氨酸、叶酸、核酸、果糖、低聚料,并为提高芦笋的综合利用价值提供参考。糖等。现代医学研究证明,芦笋具有抗肿瘤、降血脂、抗衰老、抗疲劳、抗突变、抗荫及防癌抗癌功效111材料与方法据统计,芦笋在加工过程中,占原料质量15%~25%的11材料与试剂芦笋皮被去掉2,这不仅造成了资源浪费,还增加了企芦笋皮山西省闻喜县绿色食品厂。业处理废弃料的成本。研究表明芦笋皮中的营养成分与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、志芦笋相似,有些营养成分含量其至超过芦笋。本课题贺氏菌、沙门氏菌、青霉菌、毛霉、黑曲霉由山西组对芦笋皮进行了一系列的研究,结果表明芦笋皮中含农业大学食品科学与工程学院微生物教研室提供有丰富的黄酮类物质和高活性的膊食纤维,具有抗疲声宀、营养琼脂、葡萄劳、降血脂功能,并对芦笋皮的水提物及乙醇提取糖等物抑制空气中常见细菌的作用进行了研究,结果表明乙12CNMHG收稿日期:2010-01-11基金项目:山西省青年科技基金研究项目(20021039)作翥两霭翠190-),支文,副教投,博土,研究方向为食品营养与卫生,Bm!ad65m742010,wo3l,No.15自品科字※基础研究YXQ-SG46-280手提式压力蒸汽灭菌器上海博迅浓度的芦笋皮乙醇提取物溶液加入牛津杯中至满,置37℃实业有限公司医疗设备厂;F2102植物粉碎机天津市或28℃恒温培养箱中培养18~24h,然后取出,观察杯泰斯特仪器有限公司;数显恒温水浴锅江苏省金坛市周围细菌或霉菌的生长情况,测其抑蘭圈直径。江南仪器厂;HPP9272电热恒温培养箱北京市东联哈尔仪器制造有限公司:DHG9243BSⅢ电热恒温鼓风干2结果与分析燥箱上海新苗医疗器械制造有限公司:HQC空气浴21芦笋皮乙醇提取物对细菌的抑制作用振荡器哈尔滨市医疗仪器厂;SZX-2P超净工作台上海市整新电子设备厂;BS224s电子天平北京赛多利斯20「金黄色葡萄球菌“志贺仪器系统有限公司;JDG0.2型真空冻干试验机兰州投上芽杆菌氏面科近真空冻干技术有限公司。13方法131液体培养基的制备1细菌液体培养基的制备:称取牛肉膏5g、蛋白胨10质量浓度ge/10OmL)l0g、NaCl5g溶解于10mnL蒸馏水中,调pH7,2,12lt图1芦笋皮乙醇提物的抑菌作用灭菌20min,待用,Fig-1 Antibacterial activity of ethanol extract from霉荫PDA液体培养基的制备:去皮马铃薯200gofficinalis peel切成小块,加1000mL蒸馏水煮沸30min,双层纱布过由图1可见,芦笋皮乙醇提取物对金黄色葡萄球滤,滤液中加入2g/100mL葡萄糖,121℃灭菌20min,待用。菌、大肠杆菌、枯草芽他杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌均有抑制作用,且随着溶液质量浓度的增加抑制作用132固体培养基的制备增强。同一质量浓度的醇提物溶液对这5种菌的抑制能细菌固体培养基的制备:称取9g营养琼脂溶解力由强到弱依次为:金黄色葡萄球、志贺氏菌、枯于装有200mL蒸馏水的锥形瓶中,12℃灭菌20mim,草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌。金黄色葡萄球待用。菌实验最低抑菌质量浓度为1g/100mL,其余4种细菌霉菌PDA固体培养基的制备:去皮马铃薯200g,均为5g/100mL切成小块,加1000mL蒸馏水煮沸30min,双层纱布过22芦笋皮乙醇提取物对霉菌的抑制作用滤,滤液中加入2g/l0omL葡萄糖和2g0onL琼脂,12l℃灭菌20min,待用133菌种的活化口毛霉将原试管菌种接种于试管斜面培养基上,细菌在37℃的恒温培养箱中培养24h,霉菌在28℃培养24hs如}·黑曲看134菌悬液的制备将活化好的菌种接种于液体培养基内,于空气浴振荡器内培养24h。质量浓度(g/10omL35芦笋皮乙醇提取物的制备图2芦笋皮乙醇提物对莓菌的抑制作用Fig. 2 Anti-mold activity of ethanol extract from Asparagus oficinalis称取200g芦笋皮浸泡于5L80%的乙醇中,65℃浸泡2h,过滤取滤液,于45℃使用旋转蒸发器浓缩,然后用真空冷冻干燥机干燥,配制成1、5、10、15、由图2可见,芦笋皮乙醇提取物对3种莓菌的抑制20、30、40g/100mL的提取物水溶液,备用。作用不同,质量浓度10~40g/100mL对青霉均有抑制作136双蝶的制备用,而且质量浓度越高抑制作用越强;30g/100mL和取已校正好底部水平的平皿,加15mL培养基作为40g100m的乙醇提取物对毛霉有抑制作用;质量浓度底层,平皿加0.mL菌悬液,并均匀涂布在底层上作为为40菌层,置水平台上冷却备用中国煤化工莓有抑制作用137抑菌实验CNMHG在制备好的平皿中放置不锈钢牛津杯,将不同质量芦笋皮乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、基础研究良品利字2010,Wo.3l,No.15枯草芽孢杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌和青霉、毛霉、参考文献黑曲霉均有一定的抑制作用,而且对细菌的作用强于霉孙春艳赵伯涛,郁志芳等.芦笋的化学成分及药理作用的研究进菌。其抑菌作用可能与芦笋皮乙醇提取物中黄酮类化合物展门中国野生柏物资源,2004,23(5):15有关,研究表明黄酮类化合物具有很强的抑菌作用2133,顾振新,张建惠.芦笋弃料的营养价值和开发利用研究南京农业人学学报,1994,17(2)11113但也不排除芦笋皮乙醇提物中其他物质对抑菌实验起了顾振新吕凤霞,汪志君,等芦笋皮的营养价值及其原汁在加工和辅助作用。因为实验采用的芦笋皮乙醇提取物为粗提贮存中的变化叮]江苏农业研究,2001,2(2:68-71.14]冯翠萍,程红艳刘文喜,等.芦笋皮对小鼠抗疲劳作用的实验研究物,成分较多,除了黄酮类化合物(126mg/g)外,还有营养学报,2003,25(3:30-332多糖(193mg/g)等物质,多糖也有一定的抑菌作用,有15]冯翠萍,常茂,卢耀环,等.芦笋皮对实验性高脂症大鼠血脂水平的影响叮]山两农业大学学报,2001,21(3):265-267些多糖的抑菌性不具备广谱性,多糖的抑繭活性一般也间o冯翠萍,常明吕,卢罐环芦笋皮对人鼠脂质过氧化作用的实验研比较单一、针对性较强。有报道指出猴头繭多糖对口究Cy中国农学会中国青年农业科学学术年报2002:415418腔类细菌有抑制作用山4,羟甲基大豆多糖对枯草杆菌和m冯翠萍,庞侯英常明吕,等.酶法提取芦笋皮中高活性膳食纤维的研究[门农业工程学报,2004,203)188191腊样芽孢杆菌有抑制作用,鱼腥草的水溶性多糖和爬山图冯嗶萍,庞侯英,土晓闻,等.芦笋皮中黃酮类化合物的提取、纯虎多糖{1被证实也有不同程度的抑菌作用。因此关于芦化厂艺的研究[Cy中国农学会中国青年农业科学学术年报,2004417420笋皮乙醇提取物抑菌的机理还有待于进一步研究。冯翠萍,王亚琴芦笋皮抑菌作用的研究门食品科学,200,2812)105-109结论[0郝林.食品微生物学实验技术M]北京:中国农业出版社,2001:5;芦笋皮乙醇提取物对金黄色葡萄球蘭、大肠杆菌、Ⅲ]刘冬梅李理杨晓泉,等用牛津杯法测定益生菌的抑菌活加食品研究与开发,2006,27(3):11011枯草芽孢杆菌、志贺氏菌、沙门氏荫和青霉、毛莓、黑[12】翟爱华韩艳慧,杨健麦胚英酮抑菌作用研究口黑龙江八一农垦曲霉均有抑制作用,但抑制细菌的能力明显强于霉菌人学学报,2005,17(5):69-72[3]李学坚.银合欢叶总黄酮抑菌、利尿的实验研究门广西中医学院金黄色葡萄球菌实验最低抑制质量浓度为』g/10mL,其学报,2005,8(3):13-14余4种细繭均为5g/100mL,且随着提取物溶液质量浓度14张庭红,潘弹红,朱升学餐头制备物的抑菌活性研究门安激师范大学学报:自然科学版203,26(2)159-160的增大抑菌作用增强,抑制青霉、毛霉、黑曲霉的最1董爱文,陈建华周辉,等爬山虎多糖的提取及抑菌作用U,广州低质量浓度分别为10、30、40g/100mL食品工业科技,2003,193)15-17中国煤化工CNMHG