EGF和AngⅡ激活人肾上腺皮质癌H295R细胞ERK通路

目的 研究表皮生长因子(EGF)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)联合作用对肾上腺皮质癌H295R细胞的细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响.方法 用不同剂量的EGF和Ang Ⅱ刺激H295R细胞,或用特异性EGF受体酪氨酸激酶抑制剂AG1478预处理后再加入AngⅡ刺激细胞,用Western blot法检测磷酸化ERK1/2；EGF及AngⅡ单独或联合刺激细胞,检测ERK1/2、P90RSK和Bad的磷酸化水平.结果 EGF和AngⅡ均刺激细胞ERK1/2和P90RSK磷酸化,在刺激ERK1/2磷酸化上呈剂量依赖性,两者联合处理其激活ERK1/2和P90RSK的作用产生叠加,AngⅡ和EGF单独及联合处理细胞,ERK1/2磷酸化水平分别是对照组的6.3±1.4、2.2±0.6及10.1±1.1倍.AngⅡ刺激细胞Bad磷酸化,而EGF无此作用.AG1478不能阻断AngⅡ诱导的Erk1/2激活.结论 EGF和AngⅡ明显激活H295R细胞的ERK信号通路,两者作用有叠加效应.