槐花多糖提取工艺的研究

第50卷第13期湖北农业科学Vol. 50 No 132011年7月Hubei Agricultural Sciences槐花多糖提取工艺的硏究王红庆,赵丽平,朱晓明(信阳农业高等专科学校生物技术系河南信阳464000摘要:采用单因素实脸和正交试验设计探讨槐花多糖提取工艺条件对提取率的形响,研究了料液比、提取温度、提取时间等因素对槐花多糖提取率的影响。提取槐花多糖的最佳工艺条件为料液比125、提取温度80℃、提取时间6h,该工艺条件下槐花多糖的提取率为3.10%关键词:槐花多糖;提取工艺;提取率中图分类号:S79226;TQ9141文献标识码:A文章编号:0439-8114(201)13-2733-03Research on the Extraction Technology of Polysaccharides from Sophora japonicaWANG Hong-qing, ZHAO Li-ping, ZHDepartment of Biotechnology, Xinyang Agricultural College, Xinyang 464000, Henan, China)Abstract: Single factor test and orthogonal design was adopted to study the effects of solid to liquid ratio, extraction temper-ature and time on extraction efficiency of the extraction technology of polysaccharides from Sophora japonica flower. The re-sults showed that the highest extraction rate of polysaccharides could be obtained if extracted at 80C for 6 h with a solid toliquid ratio of 1: 25: the extraction ratio of polysaccharides was 3. 10 under these conditionKey words: Sophora japonica flower polysaccharides; extraction technology extraction rate收稿日期:2010-12-14作者简介:王红庆(1969-)男河南平舆人,实验师硕士,主要从事化学实验和教学工作,(电话)13837693260(电子信箱)whq1969@sina.com“+-线,在16h刚好处于种子生长的中后期,这时的菌16h。本研究为进一步了解菌种Ws4006-7E-NUT-体数量最多,种子生长最为旺盛,接种这时期的种21的特性以及提高L苏氨酸的产量提供了参考依子发酵产酸量最多。据,为苏氨酸发酵的工业化生产奠定了一定的基参考文献[]黄金,徐庆阳陈宁,L-苏氨酸的生产方法及研究进展[]南工业大学学报(自然科学版),2007,28(5):88-92[2]贾冬舒.苏氨酸市场现状及发展前景[J].饲料广角,200(1):028-30.680121416182022[3]石天虹,刘雪兰,刘辉等微生物发酵的影响因素及其控制[J]种龄/h家禽科学,2005(2):4548图5种子培养时间对发酵的影响[4]王扬,张力,李伟星等.亚硝基瓢诱变选育L苏氨酸高产菌的研究[].贵州农业科学,2010(4):107-1093结论[5]解晓鹏L一苏氨酸高产菌的选育[D]兰州:甘肃农业大学,200[6]储艹,出通「"].北京:化学工业出本试验应用正交设计,确定了种子培养基的最版中国煤化工佳组成为:葡萄糖30gL,硫酸铵3g1,玉米浆40g/,[7CNMHG界条件的优化[D]西酵母膏5g/L;用单因素试验设计确定了种子的最佳培养条件:250mL的三角瓶中装液量25mL,种8】自秀峰.发醇工艺学M.北京中国医药科技出版社,209子培养基的初始pH值7.0,接种量10%,培养时间(贵任编辑向闱)2734湖北农业科学2011年槐花又名槐米、槐蕊、槐花米,始载于《日华子压抽滤,并依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤,干燥本草》,为豆科植物槐( Sophora japonica)的干燥花后即可得到粗多糖样品按下列公式计算提取率蕾或花,微寒、味苦叩。槐花具有止血、促血凝、利尿、槐花多糖提取率=多糖质量×10%抗真菌、清热泻火、清肝明目等功效,临床上可用作防治高血压、动脉硬化以及治疗皮肤炎症的辅助药1.2.2正交设计选取料液比、提取温度和提取时物2)。20世纪初,国内外开始对槐花中的化学成分间3个因素分别设置3个水平进行正交试验,进行研究,已确定其中含有黄酮、植物甾类、鞣质、各因素及水平见表1。氨基酸、蛋白质、烯酸及微量元素等多种成分。此表1正交试验因素与水平前,对槐花化学成分的研究和利用主要集中在黄酮类化合物上,把槐花作为提取芦丁的主要原料3。多水平A料液比∥gmLB温度CC时间/h糖是自然界和生物体中广泛存在的物质,它是生物75体内一类重要的大分子,具有提高免疫能力、降糖、抗肿瘤、抗病毒等功能,是药理学研究的新热1:30点。该试验从槐花中提取多糖,考察了料液比提取温度和提取时间等因素对多糖得率的影响旨在2结果与分析为槐花多糖的开发和利用提供参考。2.1料液比对提取率的影响1材料与方法由图1可看出,提取率随料液比的减小先呈上升趋势,1:25时提取率最大,此后随着液料比的减11材料与仪器小,提取率呈下降趋势。1.1.1材料实验用槐花采自信阳贤山。摘取新鲜初开的槐花,去梗后,放入恒温鼓风干燥箱中于80℃烘干,然后粉碎成粉末状,并装入干净塑料袋中密封保存1.1.2试剂无水乙醇(上海马陆制药厂)、丙酮(武汉中天化工责任有限公司)、乙醚(武汉中天化1:151:201:251:301:35工责任有限公司)均为分析纯。料液比∥gpmL1.1.3仪器倾斜式高速万能粉碎机(北京中兴伟图1料液比对粗多糖提取率的影响业仪器有限公司制造)、艾柯纯水机(成都康氏康宁22提取温度对提取率的影响科技发展有限公司)、电热恒温鼓风干燥箱(上海贺温度过低,不利于多糖物质的溶出,而温度过德实验设备公司)数显恒温水浴锅、FA1064电光天高容易引起多糖降解。由图2看出,在70-80℃时提平(上海精密天平仪器厂)、KA-1000飞鸽牌系列离取率随温度升高而升高,超过80℃时,随着温度的心机(上海安亭科学仪器厂)。升高提取率有缓慢下降的趋势。12试验方法1.2.1单因素试验取槐花粉末2.0g,倒入锥形瓶中,以水作为溶剂,采用不同的料液比(W/v2gmL)提取温度和提取时间提取槐花多糖。①料液备15比:将5份均为2.0g的槐花粉末,分别按1:151:20、1:25、1:30、1:35加入纯水,并贴上标签放入80℃7075808590水浴锅中浸提6h;②提取温度:加50mL蒸馏水于温度/C20g槐花粉末中,分别于70、75、80、8590℃水浴图2温度对粗多糖提取率的影响锅中浸提6h;③提取时间固定提取温度80℃料23提取时间对提取率的影响液比125分别浸提34、5、6、7h。将①③所得浸提中国煤化工内随提取时间的液400ry/min离心15min,取沉淀加纯水进行第二延长CNMHG变得平缓。延长次提取(共提取4次),合并4次离心上清液,减压提取时间会提高提取率,但当细胞中的有效成分已蒸馏。在浓缩液中加入无水乙醇使其体积分数为完全溶出时,再延长提取时间,非但不能提高提取80%,静置沉淀24h。最后用布氏漏斗对溶液进行减率,反而会增加提取液中杂质的含量第13期王红庆等:槐花多糖提取工艺的研究27353结论对槐花多糖成分提取的研究,有利于槐花在医学和药学等方面的进一步开发利用。本实验所得槐05花多糖的提取率为3.10%,今后还需对原材料及其他实验条件等进行分析,以进一步优化提取条件,3时间对粗多糖提取率的影响提高提取率。对槐花多糖的其他方面,如分离纯化、组分鉴定、分子量测定以及生物活性测定等,也有24正交试验结果待深人地研究。从表2可看出,不同因素对提取率均有影响,参考文瞰从极差R值可知,3个因素对多糖提取率影响的主[李皰毙,原思通肖永庆中药槐花化学成分药理作用及炮制次顺序为:B>C>A,即温度为主要影响因素,浸提时研究进展[].中国中医药信息杂志2002,9(6):7-82间次之,料液比的影响最小。以提取率为指标确定2]董艳芬李坚槐花的现代研究与临床应用[中医药信息最佳提取T艺条件为A2BC3,即料液比1:25提取温01,18(6):21-23度80℃提取时间6h,由于该工艺组合包含在正交[3]吴虹霁,兰昌云陈媛.槐花的研究进展[门.广东微量元素科学,2006,13(6):1-6.表的试验中,不需进行验证试验,在此最佳条件下4]王晨明.植物多糖的药理作用[].中国药业,2002,1(11):73-槐花粗多糖的提取率为310%。表2正交试验结果与分析[5]史晓磊,段雅庆.超声波提取芦笋中多糖的工艺研究[J].农产品加工学刊,2009(12):6668试验号A[6]方幼兰,刘艳如林少琴.芦笋多糖的研究[.福建师范大学学报(自然科学版),1995,11(2):69-73.[7]钟俊桢,刘玮琳刘成梅.南瓜多糖的提取与纯化的研究[].农2.72产品加工,2009(1):69-71.[8]许燕燕植物多糖的提取方法和工艺[J福建水产,2006(3):33-[9]杨海花,翁寒梅管永光石仙桃多糖的提取工艺及纯化研究[食品科学,2009,30(2):130-133.[10]王丽华,段玉峰,马艳丽.槐花多糖的提取工艺及抗氧化活性研究(].西北农林科技大学学报(自然科学版),2008,36(8):213-217x2240265[]陈明,汪善锋.米多糖的提取工艺及其生物活性的研究进展[J].食品研究与开发,200,28(6):173-176(贲任编辑向闹)(上接第2719页)2002,24(4):169-ciety of Taiwan annual meeting [C]. The Fisheries Society of5]唐启升,中国专属经济区海洋生物资源与栖息环境[M].北京:Taiwan. 2002.科学出版社,20062] LIAO C H, LU T Y, HUNG C Y. Morphometric variation be[6]黄梓荣.南海北部陆架区头足类的种类组成和资源密度分布tween the swordtip ( Photololigo edulis )and mitre (P. chi-.南方水产,2008,4(5):1-7squids in the waters off Taiwan[J]. Journal of Marine[7]张杜丽,叶孙忠,洪明进等.闽南一台湾浅滩渔场中国枪乌赋Science and Technology, 2010, 18(3): 405-412.生物学特性研究[J.福建水产,2008(1):1-5[13] WANG K Y, LEE K T, LIAO C H. Age, growth and matura-8]宋海棠,丁天明徐开达,东海剑尖枪乌贼的数量分布和生长特tion of swordtip squid Photololigo edulis )in the southen性研究[浙江海洋学院学报(自然科学版),2008,27(2):East China Sea[J]. Journal of Marine Science and Technolo-115-118g,2010,l8(1):99-105.9]江艳娥林昭进黄梓荣.南海北部大陆架区渔业生物多样性研[14]丁稠血片物学等征[浙江海洋学究[J.南方水产,2009,5(5):32-37中国煤化[10]李成林张艳萍赵斌等.胶州湾曼氏无针乌贼资源量与季[15]张看CNMHG源及其可持续利用节变化的调查研究[J.渔业科学进展,200930(3):62-671EEKT, WANG K Y, LIAO C H. Studics on the maturation[16]洪明进,福建光诱鱿鱼敷网生产情况和渔获组成调查研究报of swordtip squid( Photololigp edulis) in the waters off north告[J.福建水产,2002(2):28-33Taiwan[A]. Program and abstracts 2002 Fisheries So(责任编辑张利艳)