聚烯烃滴眼剂瓶中4种抗氧剂含量测定及迁移研究

聚烯烃滴眼剂瓶中4种抗氧剂含量测定及迁移研究朱海燕,张广湘,郑杰(广东省医疗器械质量监督检验所,广东广州510663)〔中图分类号〕R987〔文献标识码〕B〔文章编号〕1002-2376(2015)11-0024-02〔摘要〕目的:建立测定聚烯烃滴眼剂瓶中抗氧化剂1010、330、l68、1076的高效液相色谱法(HPLC),并研究这4种抗氧剂向玻璃酸钠滴眼液中的迁移情况。方法:色谱柱为 Inertsil③OSSP,(5μm,4.6m×250mm流动相为乙腈-四氢呋喃-水(体积比6∶3:1),柱温为25℃,流速为1.Oml/min,检測波长为276m和266nm,柱温为25℃。结果:抗氧剂1010、330、168、1076分别在0.9996~79.97μg/ml,0.5049~80.78g/ml,1.531~40.11pg/ml,2.035~81.42μg/ml范围内线性关系良好,加标回收率在82.17%-120.39%内,相应RSD均小于5%。结论:本文所建方法准确、灵敏、简便,适用于聚烯烃滴眼剂瓶及玻璃酸钠滴眼液中四种抗氧剂的含量检测。〔关键词〕抗氧剂;聚烯烃滴眼剂瓶;HPLC聚烯烃作为塑料包装产品的主流,常用于滴眼剂的包装求。《欧洲药典》7.03版对非肠道制剂及眼科制剂用聚丙烯中,聚烯烃加工工艺时常加人酚类、亚磷酸酯类、硫酯类抗氧包装容器规定配方中单个抗氧剂含量不得超过0.3%,总量不剂,抗氧剂与药液接触时发生相互作用或直接迁移至药液时,得超过0.3%。本研究参照《欧洲药典》及相关文献,建立影响药效的发挥甚至危及人体健康。因而,严格控制滴眼高效液相色谱法测定聚丙烯型及低密度聚乙烯单剂量滴眼剂剂瓶中抗氧剂含量及其迁移量是必要的。国内YBB药包材标瓶中抗氧剂含量及其在玻璃酸钠滴眼液中的迁移量,所建方准收录的滴眼剂瓶有聚丙烯型及低密度聚乙烯型,但并未法简便,结果准确,专属性强,可有效控制产品的质量对抗氧剂作出相关规定。玻璃酸钠滴眼液临床上主要用于各1实验部分种内外因疾患所致的角结膜上皮损伤,尤其适用于干燥综合1.1试验仪器:LC-20A高效液相色谱仪(日本岛津公司),色征和斯-约综合征等需长期用药的患者,玻璃酸钠滴眼液按进谱柱 Inertsil ODS-SP,(5μm,4.6mm×250mm); Synergy超口西药标准进行质量控制,暂未查阅到其对抗氧剂的限量要纯水系统( Merck millipore);电子天平(BS210S, sartorius公司);手动固相萃取仪(AES-12,天津奥特赛恩斯有限公司);固收稿日期:2015-09-06相萃取小柱: Wondasep C18。作用使体系的黏度大幅度上升,其本身具有非离子型的特性目前对于医疗器械材料的生物相容性评价方法包括动物在水介质中不会离子化,所以可以和许多水溶性的聚合物、表试验和体外试验,根据材料的性质和作用部位的不同,使用不面活性剂、盐共存,是含高浓度电解质溶液的一种优良的胶体同的评价方法。目前来说,被中国药典和ISO收录的方法有几增稠剂,并且对许多一价和二价的高浓度电解质溶液有增稠十种,但是中国国家标准GB/l686是国内最权威的医疗器作用。综合以上内容,羟乙基纤维素是一种十分优良的增稠凝械生物学评价方法。根据产品的预期用途,对该伤口抑菌凝胶胶敷料基质敷料进行细胞毒和皮内刺激等生物学评价,目的是为了预知新型环保型高分子聚合物——聚六亚甲基单胍盐酸盐具和避免该材料应用于人体后可能导致的不良反应,为进一步有优越的杀菌活性,属于新一代的杀菌剂,其优越性能主要体现的临床研究提供依据。在一下几方面:(1)具有高效的杀菌能力仅需少量添加就表现[参考文献]出优异的杀菌性能,平均杀灭率99.9%。(2)安全系数高,无毒1]程娟,柯军颜林.壳聚糖创伤敷料的生物学评价[J.中国医疗副作用,对皮肤黏膜、眼睛无刺激,体外细胞毒试验显示细胞毒器械信息,2011,6(9):4042性小于1级。(3)作用时间持久,独特的杀菌机理,不会引起细2]中华人民共和国国家质量监督检验总局GB1688.5-2005医疗器菌耐药,长久有效。(4)环境友好型杀菌剂,无色无味、不挥发械生物学评价第5部分,体外细胞毒性试验[S].北京:中国标准出不含重金属和酚类物质,对各类处理表面无腐蚀。凭借这些优越的性能,该类杀菌剂广泛应用于医疗卫生、日用化学、纺织、造[3cH中国煤化工3周9805器纸、水产、农业等领域。在本产品中,胍盐作为杀菌防腐剂显示CNMHG型超敏反应试验S.北京出卓越的性能。前期的微生物抑菌试验中,该产品对伤口中常中国标准出版社,2003见的诸如大肠杆菌、绿脓杄菌和金黄色葡萄球菌等细菌都显示4赵明,邵自强,敖玲玲.羟乙基纤维素的性能、应用与市场现状[J].纤维素科学与技术,2013,10(2):70-78出强大的杀灭效果,杀菌率达到了100%Medical Equipment Vol. 28, No. 111.2试剂与样品:抗氧剂168:亚磷酸三(2,4-二叔丁基苯基)2方法学验证酯,C42H63O3P,CAS:31570044,批号: MKBFO813Ⅴ,98%;抗2.1线性实验:将对照液A、对照液B稀释至不同浓度溶液,氧剂330对照品:1,3,5-三甲基2,4,6-三(3,5-二叔丁基斗-羟按¨1.3”色谱条件测定,每个浓度测3次,取平均值。抗氧剂基苄基)苯,C54H7803,CAS:1709-702,批号:MKBF6l88V,168结构为亚磷酸盐,易被氧化成168氧化物。因此抗氧剂99%;抗氧剂1010对照品:四-[β-(3,5-二叔丁基4羟基苯基)168以抗氧剂168与抗氧剂168氧化物测得浓度之和表示。峰丙酸]季戊四醇酯,C73Hl08012,CAS:6683-19-8,批号:MK-面积为横坐标(A),浓度为纵坐标(C),进行线性回归,得抗氧BF3728V,98%;抗氧剂1076对照品:β-(3,5-二叔丁基4羟基剂的线性方程苯基)丙酸正十八碳醇酯,C35H62O3,CAS:2082-79-3,批号:2.2最低检测限和定量限试验:分别称取抗氧剂l68、330MKBB8963V,99%;以上抗氧剂均购自 SIGMA- ALDRICH公司。1010、1076、168’适量,用乙腈与四氢呋喃等体积混合液溶解稀抗氧剂168氧化物(168’):三(2,4叔丁基苯基)磷酸释,定容,稀释至信噪比为3,即样品的检测限,稀释至信噪比酯,C42H63O4P,CAS:95906-11-9,购自 TORONTORESEARCH为10,即样品的定量限。CHEMICALS INS,批号:7-T-YKZ65-2,1002.3精密度试验:将对照储备液稀释成三个浓度,分别进样甲醇、乙腈、四氢呋喃均为色谱纯,二氯甲烷为分析纯;实20μl,注入液相色谱仪,每个浓度连续进样3针,记录色谱图,验用水为 Synergy超纯水抗氧剂1010的RSD在0.17%~3.58%,抗氧剂1076的RSD低密度聚乙烯单剂量滴眼剂瓶,批号:B-140901、B-在0.12%~3.10%,抗氧剂330的RSD在0.11%~5.87%,抗140902、B-140903, Equistar公司产品氧剂168的RSD在1.78%~2.89%,可见本方法的精密度玻璃酸钠滴眼液原料,批号:140901、140902、140903,ZY良好。公司产品2.4回收率试验:取滴眼剂瓶(批号分别为B-140901、聚丙烯滴眼剂瓶,批号:140501,140502,140503,FQ公司140501)4份,精密加入不同浓度的4种抗氧剂,按“1.4”项下产品。方法制备供试品S1,“1.3”方法测定各抗氧剂含量,计算回1.3色谱条件:采用 Inertsil Q ODS-sE,(5μm,4.6mm×250收率。mm)为色谱柱,乙腈-四氢呋喃-水(体积比6:3:1)为流动相取玻璃酸钠滴眼液(批号140901)4份,精密加人不同浓流速为L.Oml/min,波长:276m用于抗氧剂1010、1076和330度的4种抗氧剂,按“1.4”项下方法制备供试品S2,“1.3”方法的定量和266mm用于抗氧剂168和168氧化物的定量,进样测定各抗氧剂含量,计算回收率。量:20μl,柱温为25℃。3实验结果与评价1.4溶液制备:抗氧剂对照液:称取抗氧剂168氧化产物,抗取滴眼剂瓶及玻璃酸钠滴眼液,按“1.4”项下处理样品氧剂168、30、1010、1076标准品各约60.0mg分别溶于10.0“1.3”项下色谱条件进行分析,记录图谱,外标法定量,结果表m乙腈与四氢呋喃等体积混合的溶液中。分别吸取上述溶液明聚丙烯滴眼剂瓶抗氧剂检岀量小于0.0%,而低密度聚乙2ml用混合液(乙腈与四氢呋喃等体积混合液)稀释至50r烯单剂量滴眼剂瓶抗氧剂检出量小于等于0.0005%,而相应得对照液A、对照液B的迁移液中均未检出抗氧剂。供试液Sl:精密称定2g滴眼剂瓶,剪碎,置于圆底烧瓶4讨论中,加80ml甲苯煮沸回流2h,冷却至60℃,边搅拌边加入本研究对《欧洲药典》7.0版中抗氧剂检测色谱条件进行120m甲醇,用4号砂芯漏斗过滤。用25m甲苯-甲醇(40:改进,4种抗氧剂紫外吸收数据表明,抗氧剂1010、1076、330最60)冲洗烧瓶和漏斗,将洗液并入滤液中,用同样溶液稀释至大吸收波长为276nm,抗氧剂168及其氧化产物最大吸收波50ml。取50ml挥干,用适量四氢呋喃-乙腈(1:1)溶解残留长为266nm,本研究采用同一流动相双波长同时检测4种抗物,定容至5ml,0.45μm滤膜过滤氧剂,所建方法准确、快速、分离度能满足要求,可为聚烯烃类供试液S2:取滴眼剂瓶,剪成2cm0.5cm的长条,置烧杯滴眼剂瓶抗氧剂含量及在玻璃酸钠滴眼液中迁移量提供实验中,加水150ml洗涤,室温干燥后,移至锥形瓶中,按照6cm2/参考。m比例加入玻璃酸钠滴眼液原料150m,置于高压蒸汽灭菌锅[参考文献中,121℃保持30min,冷却至室温,移出,得样品液。取I00ml[1]曹承敬,张书珍,张铣·四种受阻酚类抗氧剂的毒理研究[J]·北样品液上C18SPE小柱(预先用3ml甲醇和3ml水依次活化)中国煤化工控制流速为1.5-2ml/mn。用5ml甲醇与3ml二氯甲烷依次[2国CNMHG药品的包装材料和容器标准洗脱,洗脱液用甲醇定容至I0ml,0.45μm滤膜过滤汇缃LS2003]欧洲药典[S].7.0版:338341医疗装备2015第11期(下半月)